Ренессанс Флоренции умещается в нескольких улицах: Дуомо и купол Брунеллески, дворец Медичи, площадь Синьории, Уффици и Понте Веккьо. Каждая остановка связывает одно здание с событием, у которого есть дата, — от конкурса на купол в 1418 году до прибытия «Давида» Микеланджело в Академию в 1873 году.
Маршрут идёт по зданиям в хронологическом порядке, от собора до Академии, и каждую остановку можно посетить. Даты отмечают событие в каждом месте, а не одно путешествие.
Медичи правили Флоренцией из палаццо Веккьо, палаццо Медичи-Риккарди, Уффици и палаццо Питти, а заговорщики напали на них в Дуомо в 1478 году. Маршрут идёт по следам семьи от кельи Козимо в 1435 году до личного коридора Вазари 1564 года.
Семь остановок, все в старом центре и почти все открытые для посетителей, показывают, как банкирская семья превратилась в герцогский двор и что она оставила после себя: учреждения, гробницы и музей.
Флоренция, 1476 год: юный Эцио Аудиторе видит, как его отца и братьев вешают по ложному обвинению, и следующую четверть века охотится на виновных — по Тоскане, Романье и Венеции, вплоть до самого Ватикана. Игра Ubisoft 2009 года воссоздала Италию Возрождения так, чтобы по ней можно было лазать и бегать по крышам, а вымышленную вражду ассасинов и тамплиеров смешала с настоящими людьми: Медичи и Пацци, Леонардо да Винчи, Катериной Сфорцей и папой из рода Борджиа.
Маршрут проходит по настоящим зданиям и городам игры. Семья Аудиторе и её вилла вымышлены; большинство окружающих их событий придумано или переставлено по сравнению с историей.