Данте писал «Божественную комедию» в изгнании из Флоренции. Этот маршрут идёт и за самим поэтом, и за теми людьми из поэмы, что существовали на самом деле: Франческой, Уголино и Пией.
Он ведёт от баптистерия и приговора 1302 года через места, связанные с душами из поэмы, и двор Вероны в Равенну, где Данте умер в 1321 году, и к пустой гробнице, которую построила для него Флоренция.
Флоренция, 1476 год: юный Эцио Аудиторе видит, как его отца и братьев вешают по ложному обвинению, и следующую четверть века охотится на виновных — по Тоскане, Романье и Венеции, вплоть до самого Ватикана. Игра Ubisoft 2009 года воссоздала Италию Возрождения так, чтобы по ней можно было лазать и бегать по крышам, а вымышленную вражду ассасинов и тамплиеров смешала с настоящими людьми: Медичи и Пацци, Леонардо да Винчи, Катериной Сфорцей и папой из рода Борджиа.
Маршрут проходит по настоящим зданиям и городам игры. Семья Аудиторе и её вилла вымышлены; большинство окружающих их событий придумано или переставлено по сравнению с историей.