Dante escribió la «Divina Comedia» desterrado de Florencia. Esta ruta sigue tanto al hombre como a las personas reales que él puso en el poema: Francesca, Ugolino y Pia.
Va desde el Baptisterio y la sentencia de 1302, pasando por los lugares ligados a las almas del poema y por la corte de Verona, hasta Rávena, donde murió en 1321, y la tumba vacía que Florencia le erigió.
Florencia, 1476: el joven Ezio Auditore ve cómo ahorcan a su padre y a sus hermanos con acusaciones falsas, y pasa el cuarto de siglo siguiente persiguiendo a los responsables por la Toscana, la Romaña y Venecia, hasta el Vaticano. El juego de Ubisoft de 2009 reconstruyó la Italia del Renacimiento para trepar y correr por los tejados, y mezcló su rivalidad inventada entre Asesinos y templarios con personajes reales: los Médici y los Pazzi, Leonardo da Vinci, Caterina Sforza y el papa Borgia.
El recorrido visita los edificios y los pueblos reales del juego. La familia Auditore y su villa son ficticias; la mayoría de los hechos que los rodean están inventados o reordenados a partir de la historia.